Introduzione:
Le molecole del RNA possono interagire estesamente con altre molecole biologiche, quale proteina, DNA e RNA e così esistono nelle cellule e negli organismi sotto forma di complessi macromolecolari. Fra loro, i complessi della RNA-proteina sono l'esistenza e la funzione di RNA uno delle forme importanti di. Il RNA abbattuto è un metodo classico per la schermatura e l'identificazione delle molecole del RNA, particolarmente le proteine d'interazione delle molecole del lncRNA ed è riconosciuto dalla maggior parte dei ricercatori e delle pubblicazioni accademiche autorevoli internazionali. Oggi FORREGENE dividerà con voi il principio sperimentale e processo tecnico di RNA abbattuto, forse potete usarlo
1. Il principio sperimentale di RNA tira giù la tecnologia:
La trascrizione e la sintesi in vitro del lncRNA dell'obiettivo o dei frammenti biotina-identificati del lncRNA (frammenti compresi del RNA hanno usato come comandi positivi e negativi) ed incubano con gli estratti delle cellule; l'uso avidina-ha ancorato le perle magnetiche per raccogliere la RNA-proteina o i complessi di RNA-RNA, dopo il lavaggio accurato, il complesso è eluito. Se individuando la molecola dell'obiettivo della proteina che interagisce con lncRNA, realizzi l'elettroforesi della proteina sulla RNA-tirata giù il prodotto, individuare la proteina bersaglio dalla macchiatura d'argento e tagliare il gel per spettrometria di massa; anche direttamente realizzare verifica occidentale della macchia sul prodotto abbattuto; se individuato per le molecole dell'obiettivo del RNA che interagiscono con lncRNA, la RNA-tirata giù i prodotti è sottoposta all'estrazione del RNA e la rilevazione specifica qRT-PCR è realizzata.
2. Il RNA tira giù il processo di esperimento della tecnologia:
Coltura cellulare
Preparazione del totale delle cellule/estratto del plasma/nucleare proteina
Il RNA tira giù l'esperimento
Elettroforesi di SDS-PAGE, macchia d'argento
Spettrometria di massa ed esperimenti del WB
Rapporto sperimentale
La seguente figura mostra che i risultati di Bio--bio- RNA delle FJ tirano giù e rilevazione dell'elettroforesi di SDS-PAGE, in cui la freccia rossa segna la banda di differenza:
Il gruppo di ricerca del professor Song Xu dell'università di Sichuan ha accumulato 15 anni di accumulazione a lungo termine nel campo della ricerca del lncRNA. Foregene gruppo di ricerca del professor e bio- Song Xu ha cooperato per lanciare il RNA per tirare giù la tecnologia di lncRNA, che vi fornirà risultato soddisfacente per il vostro esperimento.
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