MiRNA Isolation Kit animale può essere immagazzinata per 24 mesi nelle condizioni asciutte alla temperatura ambiente (15-25°C), se deve essere immagazzinato per un periodo più lungo, può essere immagazzinato al miRL dell'amplificatore 2-8°C. può essere disposto a 4°C per 1 mese dopo l'aggiunta del β-mercaptoetanolo (è raccomandato ora per aggiungerlo).
Componenti del corredo
◆MiRL dell'amplificatore: Fornisce l'ambiente per macinazione e lisi dei tessuti animali e dell'ambiente della colonna.
◆Amplificatore miRW1: Rimuova le impurità quali proteina e DNA in RNA.
◆Amplificatore miRW2: Rimuova gli ioni residui del sale in RNA.
◆DdH2O senza RNAsi: per eluire il RNA totale sulla membrana della colonna di purificazione.
◆Colonna di DNA-pulizia: specificamente adsorba il DNA ed il RNA lungo del frammento nel lysate del tessuto ed il filtro
◆Rimuova le impurità solide nel prodotto incrinato.
colonna solo RNA: specificamente adsorba i piccoli frammenti di RNA.
INFORMAZIONI di prodotto
| Modello |
tipo della Rotazione-colonna |
Componenti di purificazione |
Colonna di rotazione di Foregene, reagente |
| Cambiamento continuo |
1-24 campioni |
Tempo di preparazione |
~30min (24 campioni) |
| Centrifuga |
Centrifuga della Tabella |
Enzimolisi del tessuto
separazione
|
separazione centrifuga |
|
Colonna di purificazione
Capacità di carico del RNA
|
80μg |
Volume liquido di
colonna di rotazione
|
800μl |
| Volume di eluizione |
50-200μl |
Campione di tessuto
elaborazione del volume
|
Tissue≤30mg
Cell≤5×106
|
Controllo di qualità
Secondo il sistema di qualità totale di FOREGENE, ogni serie di corredo animale di isolamento del miRNA è provata rigorosamente periodi multipli assicurare l'affidabilità e la stabilità della qualità di ogni serie di corredi.
Caratteri della colonna di DNA-pulizia
| Meccanismo |
Adsorbimento specifico di DNA, frammenti lunghi del RNA superiore al NT 200 |
| Funzione |
Rimozione di DNA e contaminazione del RNA del frammento, separazione di filtrazione e lisi lunghe |
| Volume di carico massimo |
800μl |
Caratteri solo RNA della colonna
| Capacità obbligatoria massima |
20μg |
| Volume di carico massimo |
800μl |
| Distribuzione per ampiezza del RNA |
20nt≤RNA≤200nt |
| Volume di eluizione minimo |
30μl |
| Selezione dei campioni |
Tessuto animale o cellula animale |
| Quantità massima di prodotto base |
tessuto animale 30mg o cellule 5×106 |
1*: Il sistema minimo dell'eluizione di 30μl è un volume raccomandato ragionevole che considera il tasso e la concentrazione di recupero del RNA. Se volete aumentare il rendimento di RNA, potete aumentare il volume dell'eluito; se volete aumentare la concentrazione del RNA purificato, riduca giustamente il volume dell'eluito, come usando un sistema dell'eluizione 15μl, mentre sacrificano la parte del rendimento del RNA. per ottenere un'più alta concentrazione di RNA.
2*: Per i più grandi volumi di campione, usi prego le colonne solo RNA multiple per purificazione del RNA.
Rendimento e purezza dell'estrazione del RNA
Il corredo animale di isolamento del miRNA può essere usato per purificare il miRNA da vari tessuti e cellule. Il rendimento è collegato con il campione di tessuto stesso, la quantità iniziale del campione, la freschezza del campione, il tempo di immagazzinamento del campione e l'operazione. Il RNA purificato OD260/280=1.8-2.1.
Integrità del RNA
La figura sotto mostra l'immagine dell'elettroforesi del RNA ottenuta elaborando i campioni di tessuto animale con il corredo animale di isolamento del miRNA di Foregene.
Flusso di lavoro
Note: (Legga per favore con attenzione le note prima di usando il corredo)
◆Tutte le operazione sperimentali sono eseguite alla temperatura ambiente (15-25°C) (centrifugazione compresa). Non usi il bagno di ghiaccio ed a bassa temperatura (4°C) centrifugazione.
◆Il campione dovrebbe evitare il congelamento ripetuto e lo scioglimento, altrimenti il miRNA estratto sarà degradato e l'importo dell'estrazione inoltre diminuirà.
◆La quantità di tessuto fresco non dovrebbe superare 30mg, altrimenti colpirà il rendimento e la purezza di miRNA.
◆Prima di usando il corredo, aggiunga il β-mercaptoetanolo per attenuare il miRL. Aggiunga 10μl di β-mercaptoetanolo per 1ml del miRL dell'amplificatore. È raccomandato per prepararlo per uso immediato. Dopo l'aggiunta del β-mercaptoetanolo, il miRL dell'amplificatore può essere memorizzato a 4°C per 1 mese.
◆Prima di usando il corredo, aggiunga l'etanolo assoluto per attenuare miRW2. Riferisca prego all'etichetta sul recipiente di reazione per l'importo aggiunto.
◆Vedi la tavola qui sotto per la quantità dell'aggiunta di etanolo anidro nei corredi delle specifiche differenti:
| Specifiche di prodotto |
La quantità di etanolo anidro ha aggiunto |
| RE-0101T |
6ml |
| RE-01011 |
60ml |
| RE-01012 |
120ml |
| RE-01014 |
240ml |
◆Il rendimento e la qualità del RNA sono collegati con il volume di eluizione e la quantità di campione di tessuto. È raccomandato per usare 30 mg di tessuto per μl 500 del miRL dell'amplificatore.
◆Volume di eluizione: Il volume di eluizione non dovrebbe essere più di meno di 30μl, altrimenti colpirà l'efficienza di recupero del RNA.
◆Controlli prego il miRL dell'amplificatore e l'amplificatore miRW1 nel corredo per vedere se ci sono cristalli. Se gli a cristallo sono precipitati dopo che lo stoccaggio alla bassa temperatura, voi può mettere l'amplificatore alla temperatura ambiente o 37°C per un periodo, dissolva i cristalli e la miscela molto prima di uso.
Sicurezza
- Questo prodotto è per uso di ricerca scientifica soltanto, prego non lo usa per medicina, medicina clinica, alimento ed i cosmetici.
- Quando facendo uso del corredo, indossi prego i cappotti del laboratorio, i guanti eliminabili del lattice, le maschere eliminabili, ecc. per proteggersi; ed eviti la contaminazione nella massima misura possibile artificialmente introdotta della RNAsi.
- Il miRL dell'amplificatore contiene i sali chaotropic: denaturante, irritante.
- L'amplificatore miRW2 contiene l'etanolo: Infiammabile.
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