Corredo DE-05011/05012/05013 di isolamento del DNA del tessuto animale per purificazione di DNA genomico

Isolamento Kit Cat del DNA del tessuto animale. No.DE-05011/05012/05013 per purificazione di DNA genomico dalle cellule di cultura e dall'animale

Corredo di isolamento del DNA del tessuto animale

Cat.No.DE - 05011/05012/05013

Per purificazione di DNA genomico dalle cellule di cultura e dai tessuti animali

Prodotto Descprition:

Questo corredo usa una colonna solo DNA che può specificamente legare il DNA, la proteasi di Foregene e un sistema tampone unico. Il DNA genomico di alta qualità può essere estratto dalle varie cellule di cultura e dai tessuti animali in 30 - 50 minuti.

La membrana solo DNA del gel di silice utilizzata nella colonna della rotazione è materiale unico di Foregene il nuovo, che può efficacemente e specificamente legare a DNA e massimizza la rimozione di RNA, delle proteine dell'impurità, degli ioni e di altri composti organici in cellule. il DNA genomico di alta qualità 5-80μg può essere purificato dal tessuto 10-50mg.

Componenti del prodotto:

Features&advantages:

- Nessuna contaminazione della RNAsi: La colonna solo DNA ha fornito nel corredo permette di eliminare il RNA dal DNA genomico senza RNAsi supplementare durante l'esperimento, quindi impedente il laboratorio la contaminazione dalla RNAsi esogena.

- Velocità veloce: La proteasi di Foregene ha più alta attività che i simili campioni di tessuto delle raccolte e delle proteasi più velocemente;

- Semplice: l'operazione di purificazione di DNA genomico può essere completata in 50 minuti.

- Conveniente: La centrifugazione è realizzata alla temperatura ambiente, la centrifugazione 4℃ e la precipitazione dell'etanolo di DNA non è richiesta.

- Sicurezza: nessun reagente organico è usato.

qualità alta: Il DNA genomico purificato ha grandi frammenti, nessun RNA, nessuna RNAsi ed estremamente - contenuto basso dello ione, che può soddisfare le richieste di vari esperimenti.

Applicazioni del DNA genomico:

Il DNA genomico purificato dal corredo di isolamento del DNA del tessuto animale ha elevata purezza e può essere usato per le operazioni sistematiche di biologia molecolare, come: digestione degli enzimi, PCR, ibridazione del sud, costruzione delle biblioteche ed altri esperimenti.

Controllo di qualità di prodotto:

Conformemente al sistema di qualità totale di FOREGENE, ogni serie di corredi di isolamento del DNA del tessuto animale è provata rigorosamente periodi multipli assicurare l'affidabilità e la stabilità della qualità di ogni serie di corredi.

Rendimento e purezza dell'estrazione di DNA genomico:

Il rendimento dell'estrazione del DNA genomico del tessuto animale è collegato con la fonte del tessuto, le condizioni di stoccaggio, il tempo di immagazzinamento, il dosaggio ed altri fattori. La purezza del DNA genomico ottenuto incontra l'operazione sperimentale sistematica di biologia molecolare ed il suo OD260/280 è fra 1.7-1.9. Il rendimento del DNA genomico estratto facendo uso di questo corredo è indicato nella seguente tavola:

Precauzioni: (Per favore essere sicuro di leggere con attenzione le precauzioni prima di usando il corredo)

- Il campione dovrebbe evitare il congelamento ripetuto e lo scioglimento, altrimenti le sequenze di DNA estratte saranno più piccole ed il rendimento dell'estrazione sarà ridotto.

- Prima di usando il corredo, per controllare con attenzione se c'è precipitazione nell'amplificatore L1, nell'amplificatore L2 e nell'amplificatore PW. Se c'è precipitazione, dissolvala prego a 37℃, miscela molto prima di uso.

- Prima di usando il corredo, sia sicuro di controllare se il WB dell'amplificatore si aggiunge con etanolo anidro secondo le istruzioni. Il WB dell'amplificatore si è aggiunto con 60ml etanolo anidro (DE-05011), 120ml etanolo anidro (DE-05012) e 300ml etanolo anidro (DE-053013) prima dell'uso.

- Volume di eluizione: L'amplificatore eb non dovrebbe essere più di meno di 100μl, altrimenti colpirà il rendimento del DNA.

- Ricordi non aggiungere la RNAsi a tutto l'amplificatore.

- Tutti i punti di centrifugazione sono centrifugati alla temperatura ambiente (15-25℃) facendo uso di una centrifuga da tavolino.

- Tutti i punti sperimentali sono stati effettuati alla temperatura ambiente (15-25℃).

Stoccaggio e durata di prodotto in magazzino:

- Il corredo può essere immagazzinato per 12 mesi alla temperatura ambiente (15-25℃), o 2-8℃ per tempo maggiore.

Nota: Se immagazzinato alla bassa temperatura, la soluzione è a precipitazione incline. Prima dell'uso, essere sicuro di disporre la soluzione nel corredo alla temperatura ambiente per un periodo. Se necessario, preriscaldilo in un bagno d'acqua 37℃ affinchè 10 minuti dissolvano il precipitato e mescolilo prima dell'uso.

- La soluzione della proteasi di Foregene ha una formula unica ed è attiva a lungo (3 mesi) alla temperatura ambiente; la sue attività e stabilità saranno migliori una volta immagazzinate a 4℃, in modo da è raccomandato per immagazzinarlo a 4℃, si ricorda non immagazzinarlo ai risparmi di -20℃.

Caratteri solo DNA della colonna

*: Il sistema minimo dell'eluizione di 100μl è un volume raccomandato ragionevole dato in considerazione del tasso e della concentrazione di recupero del DNA. Se per aumentare il rendimento di DNA, il volume dell'eluito può essere aumentato giustamente; se per aumentare la concentrazione di DNA purificato, il volume dell'eluito può essere ridotto giustamente sui locali di sacrificio della parte del rendimento del DNA, come usando un sistema dell'eluizione 50μl, per ottenere le più alte concentrazioni di DNA.

Rendimento e purezza dell'estrazione di DNA genomico

Il rendimento dell'estrazione del DNA genomico del tessuto animale è collegato con la fonte del tessuto, le condizioni di stoccaggio, il tempo di immagazzinamento, il dosaggio ed altri fattori. La purezza del DNA genomico ottenuto incontra l'operazione sperimentale sistematica di biologia molecolare ed il suo OD260/280 è fra 1.7-1.9. Il rendimento del DNA genomico estratto facendo uso di questo corredo è indicato nella seguente tavola:

Nota: I dati in questa tavola sono per riferimento soltanto. Nell'operazione reale, i dati ottenuti saranno leggermente differenti dai dati in questa tavola dovuto i fattori quali le condizioni di stoccaggio e la competenza di funzionamento dei materiali utilizzati.

Flusso di lavoro

Guida di analisi di problema

Seguire è un'analisi dei problemi che possono essere incontrati nell'estrazione del DNA genomico dai campioni di tessuto, sperante di essere utile ai vostri esperimenti. Inoltre, per altri sperimentale o problemi tecnici all'infuori delle istruzioni dell'operazione e dell'analisi di problema, abbiamo dedicato il supporto tecnico per aiutarvi. Se avete qualunque bisogni, contattici prego: 028-83360257 o il E-Mali: Tech@foregene.com.

Rendimento basso o nessun DNA

Ci sono solitamente fattori multipli che colpiscono il rendimento del DNA genomico, compreso la fonte del campione, le condizioni di stoccaggio del campione, il pretrattamento del campione, la manipolazione, ecc.

Il DNA genomico non ha potuto essere ottenuto durante l'estrazione

1. I campioni di tessuto impropriamente sono immagazzinati o immagazzinati per troppo tempo, con conseguente degradazione del DNA genomico.

Raccomandazione: Campioni di tessuto del deposito in azoto liquido o in -80°C; provi ad usare recentemente ha raccolto i campioni di tessuto per l'estrazione di DNA genomico.

2. Troppo poco consumo del tessuto può condurre all'omissione di estrarre il DNA genomico corrispondente.

Suggerimento: Per i campioni di tessuto che sono stati immagazzinati a lungo o hanno degradazione severa di DNA genomico, la quantità di campioni di tessuto può essere aumentata giustamente per estrarre il considerevole DNA genomico. La quantità di campione può essere determinata secondo i bisogni del DNA, ma non dovrebbe superare 50mg.

3. Stoccaggio improprio dei risultati della proteasi di Foregene nell'attività riduttrice o inattivata.

Raccomandazione: Confermi le condizioni di stoccaggio della proteasi di Foregene o sostituiscala con una nuova proteasi di Foregene per idrolisi enzimatica.

4. Il corredo impropriamente è immagazzinato o immagazzinato per troppo tempo, inducente alcune componenti nel corredo a venire a mancare.

Raccomandazione: Acquisti un nuovo corredo dell'estrazione di DNA genomico del tessuto animale per le operazioni relative.

5. Uso improprio del corredo. Per esempio, alcuni tessuti hanno bisogno dei corredi speciali per elaborare.

Raccomandazione: L'acquisto del corredo per i campioni, quale l'estrazione del DNA genomico del suolo, richiede l'acquisto del corredo dedicato di isolamento del DNA del suolo.

6. WB dell'amplificatore senza aggiungere etanolo anidro.

Raccomandazione: Assicuri aggiungere il volume corretto di etanolo anidro per attenuare il WB.

7. L'eluente non è stato gocciolato correttamente sulla membrana della silice.

Suggerimento: Aggiunga l'eluente preriscaldato a 65°C a goccia a goccia al mezzo della membrana del gel di silice e lascilo alla temperatura ambiente per 5 minuti per aumentare l'efficienza dell'eluizione.

DNA genomico estratto con rendimento basso

1. Il campione impropriamente è immagazzinato o immagazzinato per troppo tempo, con conseguente degradazione del DNA genomico.

Raccomandazione: Campioni di tessuto del deposito in azoto liquido o in -80; provi ad usare recentemente ha raccolto i campioni di tessuto per l'estrazione di DNA genomico.

2. Se la quantità di campioni di tessuto è troppo piccola, il DNA genomico estratto sarà più di meno.

Suggerimento: Per i campioni di tessuto che sono stati immagazzinati a lungo o hanno degradazione severa di DNA genomico, la quantità di campioni di tessuto può essere aumentata giustamente per ottenere il considerevole DNA genomico. La quantità di campione può essere determinata secondo i bisogni del DNA, ma non dovrebbe superare 50mg.

3. L'eccessiva quantità di campione condurrà a digestione incompleta ed a centrifugazione incompleta. La colonna di purificazione può essere bloccata durante la centrifugazione sulla colonna ed il DNA genomico estratto sarà più di meno.

Suggerimento: Secondo i tessuti differenti, il dosaggio dovrebbe essere regolato all'interno di mg 10-50. Quando la digestione è incompleta o la colonna di purificazione è bloccata, riduca prego il dosaggio corrispondente del tessuto.

4. Il campione non è preelaborato o non preelaborato in modo incompleto.

Suggerimento: I campioni specialmente conservati o alcuni campioni relativamente speciali devono essere pretrattati prima di idrolisi enzimatica, che può rimuovere la soluzione di conservazione del campione o fattori che colpiscono l'attività della proteasi, di modo che la reazione enzimatica di idrolisi può essere effettuata più completamente e il più alto DNA genomico del rendimento può essere ottenuto.

5. Lo speciale ha conservato i campioni di tessuto, quali la coda di ratto e paraffina-incastonata, ecc.

Raccomandazione: Acquisti un corredo dedicato dell'estrazione di DNA genomico, quali i campioni paraffina-incastonati, voi può scegliere il corredo di isolamento del DNA di FFPE; campioni della coda del topo, potete scegliere il DNA Mini Kit della coda del topo. Questi tessuti sono trattati con i loro corredi speciali ed il rendimento dell'estrazione del DNA sarà più alto e l'effetto sarà più ideale.

6. Stoccaggio improprio dei risultati della proteasi di Foregene nell'attività riduttrice o inattivata.

Raccomandazione: Confermi le condizioni di stoccaggio della proteasi di Foregene o sostituiscala con una nuova proteasi di Foregene per idrolisi enzimatica.

7. Il problema dell'eluente.

Raccomandazione: Prego amplificatore eb di uso per eluizione; se facendo uso di ddH₂ O o di altri eluenti, assicuri il pH dell'eluente è fra 7.0-8.5.

8. L'eluente non si è aggiunto a goccia a goccia correttamente.

Suggerimento: Aggiunga prego la goccia dell'eluizione al mezzo della membrana della silice e lascila alla temperatura ambiente per 5 minuti per aumentare l'efficienza dell'eluizione.

9. Il volume dell'eluente è troppo basso.

Suggerimento: Usi prego l'eluente per l'eluizione secondo le istruzioni, almeno non di meno di DNA genomico che 100μl.

DNA genomico estratto con di scarsa purezza

Il di scarsa purezza del DNA genomico condurrà al guasto o all'effetto insoddisfacente degli esperimenti a valle, come: l'enzima non può essere tagliato ed il frammento del gene dell'obiettivo non può essere ottenuto dalla PCR.

1. Contaminazione varia della proteina, contaminazione del RNA.

Analisi: L'amplificatore PW non è stato usato per lavare la colonna; L'amplificatore PW non è stato usato per lavare la colonna alla velocità corretta di centrifugazione.

Raccomandazione: Provi a assicurarsi che non ci sia precipitazione nel surnatante quando il surnatante è passato attraverso la colonna; sia sicuro di lavare la colonna di purificazione con l'amplificatore PW secondo le istruzioni e questo punto non può essere omesso.

2. Inquinamento dello ione dell'impurità.

Analisi: La colonna di lavaggio del WB dell'amplificatore è stata omessa una volta o soltanto è stata lavata, con conseguente contaminazione ionica residua.

Raccomandazione: Sia sicuro di lavare due volte con il WB dell'amplificatore secondo le istruzioni rimuovere gli ioni residui il più possibile.

3. Contaminazione della RNAsi.

Analisi: La RNAsi esogena si aggiunge all'amplificatore; risultati sbagliati di operazione di lavaggio di PW dell'amplificatore in RNAsi residua, che colpisce le operazioni sperimentali del RNA a valle, quale trascrizione in vitro.

Suggerimento: I corredi acidi nucleici dell'estrazione di serie di Foregene possono eliminare il RNA senza RNAsi supplementare e tutti i reagenti nel corredo di isolamento del DNA del tessuto animale non hanno bisogno della RNAsi; sia sicuro di lavare la colonna di purificazione con l'amplificatore PW secondo le istruzioni e questo punto non può essere omesso.

4. Residui dell'etanolo.

Analisi: Dopo avere lavato la colonna di purificazione con il WB dell'amplificatore, nessuna centrifugazione vuota del tubo è stata realizzata.

Raccomandazione: Segua le istruzioni per centrifugazione vuota adeguata del tubo.

5. L'altro inquinamento delle impurità.

Analisi: I campioni conservati o i campioni speciali non sono stati preelaborati.

Raccomandazione: Pretratti completamente il campione secondo le istruzioni operative.