Corredi diretti bassi di PCR del seme della pianta del polyphe e del polisaccaride senza purificazione priore del DNA
Descrizione
Questo prodotto usa un sistema di reazione unico di lisi, che può rilasciare rapidamente il DNA genomico dai campioni del seme della pianta con il contenuto basso del polifenolo e del polisaccaride (come: il riso, il grano, il tabacco, il mais, la soia, ecc.) per uso nelle reazioni di PCR, in modo da è specialmente prova genetica su grande scala adatta. Per soddisfare le esigenze delle prove differenti di rilevazione, questo corredo può usare i tipi multipli di campioni (quali gli interi semi, piccoli tagli del tessuto, o frantumare i campioni dei semi multipli) per gli esperimenti. Fra loro, per i campioni del seme che ancora devono essere germinati, potete scegliere di tagliare i tagli del micro-tessuto (1-5mg) all'infuori dell'embrione del seme per l'esperimento; per gli esperimenti che devono essere provati in tantissimi campioni, potete scegliere di mescolare i campioni multipli e di combinarli. Dopo la molatura nelle particelle con un diametro di circa 0.5mm, l'esperimento può essere effettuato (almeno 0,1% del campione dell'obiettivo può essere individuato).
Il processo di liberazione del DNA genomico dal sistema di reazione di fenditura può essere realizzato in 5-10 minuti. Non c'è necessità per altri processi di rimuovere la proteina, il RNA o i metaboliti secondari e le tracce liberate di DNA possono essere usate come modello per le reazioni di PCR.
La miscela di PCR EasyTM del seme 2× ha forte tolleranza agli inibitori della reazione di PCR e può direttamente usare la miscela di lisi delle materie vegetali come modello per l'amplificazione efficiente e specifica. Questo reagente contiene la DNA polimerasi del D-Taq della società, i dNTPs, il MgCl2, l'amplificatore della reazione, rinforzatore della reazione di PCR, ottimizzatore e stabilizzatore modificato specialmente per la PCR diretta. Usato insieme con il sistema di reazione di lisi può individuare rapidamente e facilmente i campioni ed ha le caratteristiche di alta sensibilità, di forte specificità e di buona stabilità.
La miscela di PCR EasyTM del seme 2× (UNG) usa il dUTP invece di dTTP in base alla miscela di PCR EasyTM del seme 2× ed aggiunge l'enzima di UNG (uracile-N-GLYCOSYLASe) che può degradare il modello che contiene il dUTP allo stesso tempo. Prima della reazione di PCR, l'enzima di UNG è usato per degradare il prodotto di PCR che contiene l'uracile. L'enzima di UNG non avrà alcun effetto sul modello che non contiene l'uracile, quindi assicurante la specificità e l'accuratezza dell'amplificazione ed escludente la possibilità di prova genetica su grande scala. La contaminazione dei prodotti di PCR ha accaduto DNA polimerasi di D-Taq è una DNA polimerasi sviluppata specialmente da Foregene per le reazioni dirette di PCR. La DNA polimerasi di D-Taq ha forte tolleranza a vari inibitori della reazione di PCR e può amplificare efficientemente le tracce di DNA in vari sistemi di reazione complessi e la velocità di amplificazione può raggiungere 2Kb/min, che è particolarmente adatto a reazione di PCR Direct.
Secondo le differenze nei campioni di pianta, i prodotti sono divisi in due categorie: PCR diretta diretta del seme del corredo e della pianta di PCR del seme della pianta più il corredo. Nella fase di lisi, considerare che i tipi differenti di semi o di materiali del tessuto varino notevolmente nella quantità di reagenti utilizzati nel processo di lisi, clienti può scegliere il seme diretto corrispondente del corredo o della pianta di PCR del seme della pianta (piccolo e medio) (grande) secondo la dimensione del loro corredo diretto di PCR dei materiali sperimentali; nella fase di rilevazione di PCR, i clienti possono anche scegliere miscela del seme 2× di PCR EasyTM di PCR ordinaria EasyTM della miscela o del seme 2× (UNG) che può impedire la contaminazione dei prodotti di amplificazione di PCR secondo i bisogni sperimentali.
Conponents del corredo
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Corredo diretto II-UNG di PCR del seme della pianta
Corredo-UNG diretto di PCR del seme della pianta grande) (
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Kit Composition
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TP-0314T |
TP-03141 |
TP-03142 |
TP-03143 |
| 50 T |
200 T |
500 T |
2000 T |
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Parte I
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Amplificatore SP1 |
30ml |
120ml |
100ml×3 |
400ml×3 |
| Amplificatore SP2 |
3ml |
10ml |
25ml |
100ml |
| Amplificatore di caricamento del DNA 6× |
1.5ml |
1.5ml |
1.5ml |
1.5ml×4 |
| Parte II |
Miscela di PCR EasyTM del seme 2× (UNG) |
500μl |
1ml×2 |
1.7ml×3 |
1.7ml×12 |
| Manuale |
1 |
1 |
1 |
1 |
Caratteristica
- La purificazione che richiede tempo e costosa di nessun bisogno del DNA è richiesta.
- La richiesta del campione è piccola, appena prende un singolo seme.
- Nessun trattamento speciale come la molatura e schiacciare è richiesto e l'operazione è semplice.
- Il sistema ottimizzato di PCR permette alla PCR di avere il più alta specificità e più forte tolleranza agli inibitori della reazione di PCR.
- La miscela antiinquinamento di PCR EasyTM del seme del sistema 2× di PCR (UNG) può efficacemente eliminare l'inquinamento causato dai prodotti di PCR ed assicurare la specificità e l'accuratezza dell'amplificazione.
Applicazione
- Campo di applicazione: vari semi della pianta.
- Il DNA ha liberato da lisi del campione: usato soltanto come modello di PCR.
- Il corredo può essere usato per i seguenti scopi: identificazione dei semi, della genotipizzazione della pianta, ecc. transgenici.
Trasporto
L'intero processo del trasporto a bassa temperatura del contenitore di ghiaccio, assicurarsi che la parte II del corredo sia in uno stato di <4>
Stoccaggio
La parte I di questo corredo dovrebbe essere immagazzinata alla temperatura ambiente o a 2-8°C.
- I reagenti attenuano SP1, amplificatore SP2, amplificatore di caricamento del DNA 6×, nelle condizioni asciutte, possono essere immagazzinati per 12 mesi; se dovete immagazzinarlo per un tempo maggiore, può essere immagazzinato a 2-8°C.
Nota: Se immagazzinato alla bassa temperatura, la soluzione di SP1 dell'amplificatore è a precipitazione incline. Prima dell'uso, essere sicuro di disporre la soluzione nel corredo alla temperatura ambiente per un periodo. Se necessario, preriscaldilo 37°C in un bagno d'acqua per 10 minuti, aspettare la precipitazione per scomparire e scuota la soluzione prima dell'uso.
La parte II dovrebbe essere immagazzinata a -20°C.
- Miscela di PCR EasyTM del seme del reagente 2× (UNG), se usato frequentemente, può anche essere immagazzinato a 4°C per immagazzinamento a breve termine (usare su entro 10 giorni).
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