PCR diretta della foglia della pianta più la foglia della pianta dell'amplificatore di lisi della DNA polimerasi del corredo di PCR del corredo UNG per le piante transgeniche

PCR diretta della foglia della pianta più la foglia della pianta dell'amplificatore di lisi della DNA polimerasi del corredo di PCR del corredo-UNG per le piante transgeniche

Descrizione:

La PCR diretta della foglia della pianta più il corredo-UNG adotta un sistema tampone unico di lisi, che può rapidamente liberare il DNA genomico dai campioni della foglia delle piante con il contenuto elevato del polifenolo e del polisaccaride (quali cotone, la banana, ecc.) per la reazione di PCR. Le foglie non devono essere frantumate o tagliuzzate una volta trattate con l'amplificatore di lisi, rendente li ideali per prova genetica su grande scala.
Il processo di liberazione del DNA genomico dall'amplificatore di lisi può essere realizzato in 5-10 minuti, senza l'esigenza di altri processi della deproteinizzazione, del RNA o dei metaboliti secondari ed il DNA liberato della traccia può essere usato come modello per la reazione di PCR.
La miscela di PCR EasyTM della foglia 2× ha una forte resistenza agli inibitori della reazione di PCR e può direttamente usare il prodotto di fenditura della materia vegetale come modello per l'amplificazione efficiente e specifica. Il reagente contiene la DNA polimerasi di D-Taq, i dNTPs, il MgCl2, l'amplificatore della reazione, rinforzatore della reazione di PCR, ottimizzatore e stabilizzatore costruiti specialmente per le reazioni dirette di PCR. Può essere usato congiuntamente a lysate diretto per individuare rapidamente e facilmente i campioni ed ha le caratteristiche di alta sensibilità, di forte specificità e di buona stabilità.
La miscela di PCR EasyTM della foglia 2× (UNG) sostituisce il dTTP con dUTP in base alla miscela di PCR della foglia 2× ed allo stesso tempo aggiunge l'enzima di UNG (racil-N-glycosylase) che può degradare il modello che contiene il dUTP. Prima della reazione di PCR, il prodotto di PCR che contiene l'uracile è degradato dall'enzima di UNG. L'enzima di UNG non avrà alcun effetto sul modello che non contiene l'uracile, in modo da assicurare la specificità e l'accuratezza dell'amplificazione ed escludere la possibilità di prova genetica su grande scala. I problemi di contaminazione del prodotto di PCR sorgono.
La DNA polimerasi di D-Taq è una DNA polimerasi sviluppata specialmente per le reazioni dirette di PCR. La DNA polimerasi di D-Taq ha forte tolleranza a vari inibitori della reazione di PCR e può amplificare efficientemente le tracce di DNA in vari sistemi di reazione complessi. La velocità di amplificazione può raggiungere 2Kb/min. È particolarmente adatto a reazione di PCR Direct.
Secondo le differenze dei campioni di pianta, i prodotti sono divisi in due categorie: PCR diretta diretta della foglia del corredo e della pianta di PCR della foglia della pianta più il corredo per i polisaccaridi ed i polifenoli; nella fase di rilevazione di PCR, può essere secondo i bisogni sperimentali, scegliere la miscela comune di PCR EasyTM della foglia 2× o i 2× coprono di foglie miscela di PCR EasyTM (UNG) che ha l'effetto di impedire la contaminazione dei prodotti di amplificazione di PCR.

Specifiche:

50×20µl rxns, 200×20µl rxns, 500×20µl rxns, rxns 2000×20µl

Componenti del corredo:

Caratteristiche & vantaggi:

- Nessuna purificazione che richiede tempo e costosa del DNA

materiale senza

- Il campione semplice- può essere sottoposto alla reazione di PCR o alla reazione di lisi senza tagliare o frantumare

tempo di preparazione Miscela-riducentesi di errori di caricamento del campione di -2X e del sistema di reazione

- la preparazione del Rapido modello può essere completata in 10 minuti, la reazione di PCR può essere completata in 50 minuti

la reazione alta di capacità di lavorazione-lisi può essere completata in piatto buono di PCR 96

Parametri del corredo:

Applicazione: Identificazione delle piante transgeniche, della genotipizzazione, ecc.

Campione: foglie della pianta

Dimensione del campione: Diametro 2-3mm (metodo diretto), diametro 5-7mm (metodo di lisi)

Gamma di rilevazione: Prodotto ≤1kb di PCR

Kit Component Information

- Amplificatore PS1: Fornisce l'ambiente richiesto per la reazione di lisi della foglia della pianta.

- Amplificatore PS2: Il completamento fornisce l'ambiente richiesto per la reazione di lisi dei polisaccaridi e dei polifenoli in foglie della pianta.

- Amplificatore P2: Neutralizza il lysate in modo che non interferisca con le reazioni successive di PCR.

- Miscela di PCR EasyTM della foglia 2× (UNG): In base alla miscela di PCR EasyTM della foglia 2×, il dUTP è usato per sostituire il dTTP ed allo stesso tempo, l'enzima di UNG che può degradare il modello che contiene il dUTP si aggiunge, che può efficacemente impedire la contaminazione dei prodotti di amplificazione di PCR. Contiene la DNA polimerasi di D-Taq modificata specialmente da Fuji bio-, da UDG, da dNTPs, da MgCl2, dall'amplificatore della reazione, rinforzatore dalla reazione di PCR, ottimizzatore e stabilizzatore. Per la reazione di PCR, aggiunga appena la miscela di lisi, gli iniettori appropriati, ddH2O alla miscela di PCR EasyTM della foglia 2× (UNG) e può essere usata per la reazione di PCR.

- Soluzione tampone di carico del DNA 6×: Questo amplificatore di carico non contiene lo SDS. È raccomandato per usare la soluzione tampone di carico del DNA 6× ha fornito il corredo quando realizza l'elettroforesi del gel di agarosio per ottenere i buoni risultati dell'elettroforesi. Non usi l'amplificatore di carico che contiene lo SDS, altrimenti ci sarà una grande coda di luce nel vicolo di nuoto durante l'elettroforesi, che colpirà i risultati sperimentali.

Flusso di lavoro:

Elettroferogramma:

Stoccaggio e durata di prodotto in magazzino:

La parte I di questo corredo dovrebbe essere immagazzinata alla temperatura ambiente o a 2-8℃.

- I reagenti attenuano P1, l'amplificatore P2, l'amplificatore di carico 6×DNA possono essere immagazzinati per 12 mesi nelle condizioni asciutte; se dovuto essere immagazzinato per un tempo maggiore, i reagenti possono essere immagazzinati a 2-8℃.

La parte II di questo corredo dovrebbe essere immagazzinata a -20℃.

- I reagenti attenuano 2×Leaf la miscela di PCR EasyTM, se usati frequentemente, possono anche essere immagazzinati a 4℃ per immagazzinamento a breve termine (usare su entro 10 giorni).