Corredi orali di isolamento del DNA della carta di FTA del tampone di temperatura ambiente veloce per l'estrazione di DNA genomico

Rendimento e purezza dell'estrazione di DNA genomico

Il rendimento del DNA genomico in un piccolo campione è collegato con la fonte del campione, di condizioni di stoccaggio, di grado di idrolisi enzimatica e di operazione. Il corredo orale di isolamento del DNA della carta di Swab/FTA fornisce un efficace metodo per ottenere il DNA genomico da un piccolo campione, un tampone orale 0.5-3μg del DNA genomico può essere ottenuto generalmente (relativo al numero delle cellule contenute nel tampone orale); un punto di sangue con un diametro di 3mm può ottenere 0.2-0.5μg del DNA genomico. Il DNA genomico ottenuto ha l'elevata purezza e OD260/280≈1.7-1.9.

Dimensione del frammento di DNA genomico

Il corredo orale di isolamento del DNA della carta di Swab/FTA usa una colonna della membrana della silice per isolare e purificare il DNA genomico da varie fonti del campione. La dimensione purificata dei frammenti di DNA genomico è tutt'intorno 23 KB. Vedi qui sotto:

DNA genomico 1 e 3 tampone orale degli estratti con un diametro delle macchie di sangue di 3mm. Due repliche di ogni campione sono eluite secondo 30μl l'amplificatore l'eb, 5μl del DNA del gene e la scala del DNA 100bp è coagulata nell'elettroforesi del gel di agarosio di 1%.

Note: (Legga per favore con attenzione le note prima di usando il corredo)

◆Un tampone orale è sufficiente per ogni sistema di purificazione. Per i tamponi orali multipli, usi prego le colonne multiple di purificazione per purificazione.

◆Per singola purificazione, è raccomandato per usare 1-3 carte di FTA con un diametro di circa 3mm per gli esperimenti. Se la qualità di stoccaggio di carta del sangue non è buona, aumenti l'importo di uso.

◆Prima dell'uso, controllare con attenzione se c'è della precipitazione nell'amplificatore ST1, nell'amplificatore ST2 e nell'amplificatore PW. Se c'è precipitazione, dissolva prego a 37°C e la miscela molto prima di uso.

◆Prima di usando il corredo, sia sicuro di controllare se il WB dell'amplificatore si è aggiunto con etanolo assoluto secondo le istruzioni. Aggiunga 60ml di etanolo assoluto (DE-05811), 120ml di etanolo assoluto (DE-05812) e 300ml di etanolo assoluto (DE-05813) per attenuare il WB prima dell'uso.

◆Durante la lisi del campione, il campione dovrebbe essere immerso sempre nell'amplificatore di lisi. Se il campione aderisce al cappuccio ed alla parete interna del tubo, può essere elaborato tramite breve centrifugazione.

◆Volume di eluizione: L'uso di un sistema dell'micro-eluizione aumenterà la concentrazione nel DNA, ma l'amplificatore eb non dovrebbe essere più di meno di 15μl, altrimenti colpirà il rendimento del DNA.

◆Ricordi non aggiungere la RNAsi a tutto l'amplificatore.

◆Tutti i punti di centrifugazione sono centrifugazione alla temperatura ambiente (15-25°C) facendo uso di una centrifuga del benchtop.

◆Tutti i punti sperimentali sono effettuati alla temperatura ambiente (15-25℃)

Preparazione prima dell'operazione

Legga prego con attenzione le istruzioni prima di usando questo corredo. Il corredo orale dell'estrazione di DNA genomico della carta sangue/del tampone è semplice, conveniente e veloce funzionare e le istruzioni forniscono le informazioni complete e l'uso corretto di intero corredo. Prepari prego i materiali e le attrezzature sperimentali necessari prima dell'uso.

1. Il corredo orale di isolamento del DNA della carta di FTA del tampone può essere immagazzinato per 12 mesi nelle condizioni asciutte alla temperatura ambiente (15-25°C); se deve essere immagazzinato per un periodo più lungo, può essere immagazzinato a 2-8°C.

Nota: Se immagazzinato alla bassa temperatura, la soluzione è a precipitazione incline. Prima dell'uso, essere sicuro di disporre la soluzione nel corredo alla temperatura ambiente per un periodo. Se necessario, preriscaldilo in un bagno d'acqua 37°C affinchè 10 minuti dissolvano il precipitato e mescolilo prima dell'uso.

2. La soluzione della proteasi di Foregene ha una formula unica, che è attiva una volta immagazzinata a lungo alla temperatura ambiente (3 mesi); la sue attività e stabilità saranno migliori una volta immagazzinate a 4°C, in modo da è raccomandato per immagazzinarlo a 4°C, si ricorda non tenerlo a -20°C.